14. Агглютинины. Реакция агглютинации, ее разновидности. Рига, ронга. Реакция Кумбса (антиглобулиновый тест). Их применение.

Антитела, вызывающие реакцию АГГЛЮТИНАЦИИ, называют агглютининами, а антигены, участвующие в реакции,— агглютиногенами. Агглютинины называют обычно соответственно клеткам, которые взяты в реакцию. Так, например, агглютинины против эритроцитов — гемагглютининами.

Различают агглютинины полные и неполные.

Реакция агглютинации

Реакция агглютинации (РА) позволяет выявить Аг, локализованные на поверхности сравнительно крупных частиц. Механизм РА описывает «теория решётки», со­гласно которой двухвалентное АТ взаимодействует одним активным центром с детерминантой одной молекулы Аг, а другим — с детерминантой второй молекулы Аг. В резуль­тате подобного взаимодействия образуется агглютинат. Его формирование невозможно при дефиците или избытке АТ. Реакция проявляется склеиванием корпускулярных Аг под воздей­ствием АТ и реализуется в изотоническом растворе электролита, например 0,9% раствора NaCI. В РА также можно определять и содержание АТ в сыворотке крови больных, например, брюшным тифом (реакция Видаля) или бруцеллёзом (реакция Райта). 

Развернутая РА. Для определения АТ в сыворотке крови больного ставят развёрнутую РА. Для этого к серии разведений сыворотки крови добавляют диагностикум — взвесь убитых мик­роорганизмов. Максимальное разведение, дающее агглюти­нацию Аг, называют титром сыворотки крови.

Ориентировочная РА. Для идентификации выделенных микроорганизмов ставят ориенти­ровочную РА на предметных стёклах. Для этого к капле стандартной диагностической антисы­воротки добавляют культуру возбудителя. При положительном ре­зультате ставят развёрнутую реакцию. Ре­акцию считают положительной, если агглютинацию наблюдают в разведениях, близких к титру диагностической сыворотки.

Соматические О-Аг При взаи­модействии с АТ образуют мелкозернистые агрегаты.

Н-Аг В реакциях с Н-антисывороткой образуют рыхлые круп­ные хлопья

Vi-Ar при инкубации с Vi-антисывороткой образуется мелкозернистый агглютинат.

Пассивные реакции агглютинации

Эти реакции называются непрямыми так как при их проведении используют Аг (или АТ), искусственно сорбированные на поверхности различных корпускулярных частиц.

Реакция непрямой, или пассивной, гемагглютинации (РНГА) — одна из наиболее чувствительных серологических реакций. Основана на способности АТ взаимодей­ствовать с Аг, фиксированными на различных эритроцитах, которые при этом агглютинируют. Для большей стабильности эритроциты формалинизируют.

Реакция торможения пассивной гемагглютинации (РТПГА) —включает три компонента: Аг, АТ и Аг (АТ), адсорбированные на эритроцитах. Первоначально Аг реаги­рует с АТ , затем в смесь вносят эритроциты, сенсибилизирован­ные аналогичным Аг (или АТ). Если при взаимодействии Аг с АТ в системе не остаются свобод­ные АТ (или Аг), то агглютинации эритроцитарного диагностикума не наблюдают.

Реакция Кумбса. Метод выявляет неполные АТ, образующиеся при бру­целлёзе, резус-конфликте или системных коллагенозах. Реакция также известна как антиглобулиновый тест. Для постановки реакции необходима антиглобулиновая сыворотка, содержа­щая полные АТ. Неполные АТ предварительно инкубируют с корпускулярным Аг и вносят антиглобулиновую сыворотку. Одна молекула полных АТ взаимо­действует с двумя молекулами неполных АТ, связавших Аг, в результате происходит видимая агглютинация или гемагглютинация.

Иногда применяют антительный эритроцитарный диагностикум - эритроциты, на которых адсорбированы антитела. Например, можно обнаружить ботулинический токсин, добавляя к нему эритроцитарный антительный ботулинический диагностикум (такую реакцию называют реакцией обратной непрямой гемагглютинации (РОНГА).